【包被】抗体浓度优化与包被稀释液配方

一、T线包被抗体浓度优化:浓度范围:0.5~3.0mg/mL。梯度设计:0.5/1.0/1.5/2.0/3.0mg/mL各一点，实测T线灰度值。过低:信号不足T线浅。过高:NC膜孔径堵塞、层析速度下降、非特异结合增加。二、C线质控抗体浓度:常用0.3~1.0mg/mL，羊抗鼠/兔IgG或ProteinA。三、包被稀释液标准配方:PBS 0.01M pH7.4+海藻糖1%(w/v)保护抗体活性。增强型:加BSA1~5%封闭+Tween-20 0.5~1%使分布更均匀+NaCl 1%调节离子强度。四、划线参数:划膜仪0.7~1.0μL/cm，速度300mm/s，C-T线间距5~6mm。五、干燥:25℃湿度25%干燥20h或37℃抽风2~24h。六、正交优化:推荐L9(3⁴)正交表同时考察包被浓度×标记浓度×缓冲pH×包被液成分。来源:专利CN112557674A+生物谷/丁香通