【表面活性剂】表活选择、浓度优化与体系对比

一、四大常用表活特性对比:Tween-20 0.5~1%(不超过1%):首选温和释放;高浓度导致金-蛋白解离产生裸金假阳。Triton X-100适量:效果强但重复性不好,不太推荐量产。SDS-L(月桂基硫酸钠)浓度可加至7%(样品垫):释放能力强,用于Tween效果不理想时;比SDS温和。SDS-F(普通SDS):强去污力但可能导致蛋白变性,谨慎使用。二、不同缓冲体系假阳性强度排序(实验数据):PBS>>PB>PBST>TB(7.4)>TB(8.8)>TB(6.8)。关键发现:Tween-20≤2%时TB8.8和TB6.8假阳性为阴性。Tween浓度越高假阳性反而增强(造成裸金)。三、推荐用量:Tween-20 0.5~1%以内。PBST(PBS+Tween-20)体系优于纯PBS。Tris-HCl体系比PBS更不易产生假阳(Tris本身具有类表活性质)。整个体系(样品垫+金抗保存液)建议统一缓冲体系避免交叉。四、表活添加位置:金标抗体重悬液→加Tween-20帮助释放。标记垫处理液→加温和表活(如SDS-L)增加释放。样品垫处理液→加表活解决疏水不吸收问题消除假阳。五、配方原则:宜简不宜繁,添加物质以解决问题为原则。来源:小桔灯网+丁香园+实验数据