IVD免疫诊断反应原理与模式详解 — 小桔灯网
免疫诊断反应原理与模式详解(小桔灯网+知乎):
四种核心反应模式:
1. 双抗体夹心法(Sandwich)
原理: 固相Ab1 + 样本Ag + 标记Ab2 → Ab1-Ag-Ab2三明治
适用: 大分子抗原(蛋白质/病毒/细菌),至少2个表位
灵敏度: 最高
注意: 高浓度Hook效应(抗原过量假阴性)、RF干扰
2. 竞争法(Competitive)
原理: 标记Ab + 样本Ag + 固相Ag竞争
适用: 小分子半抗原(药物/激素/毒素),只有1个表位
判读: 信号与浓度成反比(信号越低=浓度越高)
灵敏度: 中等,取决于抗体亲和力
3. 间接法(Indirect)
原理: 固相Ag + 样本Ab + 酶标抗人IgG/IgM
适用: 抗体检测(传染病血清学/HIV/梅毒)
注意: 类风湿因子(RF)干扰、HAMA效应
4. 捕获法(Capture)
原理: 固相抗人IgM + 样本IgM + 抗原 + 标记Ab
适用: IgM抗体检测(急性感染期)
优势: 避开RF干扰和高滴度IgG竞争
三种反应流程:
- 一步法: 样本+标记试剂同时加入,最简便但易受干扰
- 延时一步法: 样本先反应一段时间再加标记试剂
- 两步法: 样本→清洗→标记试剂→清洗,特异性最好
来源: 小桔灯网+知乎 IVD行业解析2