胶体金溶液入厂/自制检验标准 — UV-Vis吸收峰/粒径TEM/分散性/Zeta电位四维验收

胶体金溶液入厂(商品化)或自制检验标准: 一、紫外-可见光谱(UV-Vis/最快速日常检验): 检测:取100μL金溶液→稀释至1mL超纯水→UV-Vis 400~800nm扫描。标准:λmax 520~530nm(粒径20~40nm)/λmax随粒径增大红移(30nm→522nm,40nm→528nm,60nm→535nm)。20nm颗粒:λmax≈520nm/OD≈1.0(1cm光程/浓度约0.01%)。峰形对称(高斯拟合R²>0.97)/半峰宽(FWHM)60~80nm(30nm颗粒)。半峰宽>100nm→粒径分布宽→不适用。目视:均匀酒红色/无蓝变/无沉淀。 二、透射电镜(TEM/粒径和金标准): 抽样频率:自制金每批次TEM/商品化金首次到货TEM+每6个月复测。制样:金溶液滴在碳支持膜铜网上→自然干燥→TEM 200kV加速电压。至少拍摄10个视场→测量≥200个颗粒→计算平均粒径±SD。标准:平均粒径±5nm标称值/CV<15%(批内颗粒均一)。出现聚集(二聚/三聚/多聚)→不合格。 三、动态光散射(DLS/粒径分布): Z-平均粒径(Z-average)与TEM平均粒径偏差<±10%。PDI(多分散指数)<0.2(0.1以下=单分散/极好;0.1~0.2=可接受;>0.2=多分散/不适用)。 四、Zeta电位(胶体稳定性): 纯柠檬酸金:Zeta电位-30~-50mV(pH中性)。绝对值<30mV→颗粒间静电排斥不足以抵抗范德华引力→有聚集风险。Zeta电位>|50|mV→过于稳定→可能与抗体的静电结合不良→标记效率低。 五、标记效率验证(预标记/每批次放行前): 取1mL金溶液→与标准量的标准抗体(如羊抗鼠IgG)在最适pH下标记→测标记后OD减少(与标记前相比约5~15%减少)→高速离心后重悬→测OD→标记回收率>80%为合格。标记效率过低→该批金溶液表面化学异常→不可用。 六、储存稳定性监控(自制金): 4°C避光保存,每2周UV-Vis检测一次→λmax漂移<±3nm/OD下降<10%/FWHM增加<±5nm→未过聚集临界点。超30天λmax/EHM/OD均显著变化→丢弃。 来源:Cytodiagnostics/BBInternational质量检验标准+CNKI金纳米表征文献