化学发光试剂校准品与质控品制备 — 基质选择/赋值/互换性/稳定性全流程

化学发光试剂校准品与质控品制备规范: 一、校准品基质选择原则:1.首选人血清基质(与临床样本互换性最好)。2.无基质效应(不引起信号系统偏差)。3.无内源性干扰物(HAMA/RF/生物素/异嗜抗体阴性)。4.需预处理:56℃30min灭活补体+离心10000g×10min+0.22μm过滤。5.脂血/黄疸/溶血血清不可作为校准品基质。 二、校准品赋值:一级校准品:用ISO 17511参考测量程序(如ID-LC-MS/MS)赋值的参考物质。二级校准品:企业工作校准品,用一级校准品+参比方法(化学发光仪比对)赋值。终端用户校准品:试剂盒内校准品(定标液),可溯源到企业工作校准品。每一级赋值需报告测量不确定度(扩展不确定度U,k=2)。 三、质控品设计:至少两个浓度水平:低值(医学决定水平附近)+高值(参考范围上限2~3倍)。质控品靶值:对每批试剂至少累积20天数据(20个工作日≥20个数据点)计算均值±SD→设定靶值±2SD和±3SD。质控品与校准品不可用同一来源(独立性原则)。 四、互换性验证(EP14):准备至少20份临床样本→同时在新方法和参比方法上检测→校准品定标后测。如果校准品导致的偏差模式与临床样本一致→互换性良好。如果校准品与临床样本偏差模式不一致→校准品无互换性→必须更换校准品基质。 五、稳定性验证:开瓶稳定性:4℃开瓶后每7天测一次持续4周(信号下降<10%合格)。长期稳定性:建议有效期12~18个月,每3个月测一次。冻融稳定性:-20℃冻融3次后性能无显著变化。运输稳定性:模拟运输(ISTA)+温度偏移测试。加速稳定性:37℃7天(预警有效期不足的信号)。 来源:ISO 17511+CLSI EP14+NMPA校准品质控品指导原则