胶体金对抗原抗体的基本要求 — 小桔灯网桔林杂谈
胶体金免疫层析对抗原抗体的基本要求（小桔灯网桔林杂谈）：
抗体要求:
1. 纯度：≥95%（SDS-PAGE验证），杂蛋白竞争金表面结合位点
2. 亲和力：Ka≥10^8 M-1（高亲和力=高灵敏度）
3. 特异性：交叉反应率<1%
4. 稳定性：4℃保存12个月不失活
抗体亚型选择:
- IgG1/IgG2a：最适合胶体金标记（Fc段稳定）
- IgM：分子量大（900kD），空间位阻大，不适合
- 鸡IgY：种属距离远，交叉反应少，但偶联效率低
抗原要求:
- 纯度≥90%
- 分子量>5kD（小分子需偶联BSA/KLH）
- 活性保持：包被后仍能有效结合抗体
抗体-金结合比:
- 每40nm金粒约结合8~12个IgG分子
- 过量抗体竞争结合，浪费且增加非特异性
- 不足量导致金粒不稳定、背景高
来源: 小桔灯网 桔林杂谈(4): 胶体金对抗原抗体的基本要求